›› 2014, Vol. 14 ›› Issue (4): 649-654.
杨益金 陆俊佳 覃霞 畅荣妮 赖青鸟 华荣 方玲 吴华裕 侯伟 吴飞翔 谢彤 袁志刚 舒伟
YANG Yi-jin LU Jun-jia QIN Xia CHANG Rong-ni LAI Qing-niao HUA Rong FANG Ling WU Hua-yu HOU Wei WU Fei-xiang XIE Tong YUAN Zhi-gang SHU Wei
摘要: 根据文献报道和NCBI数据库确定人源内皮抑制素(HE)和鼠源内皮抑制素(ME)DNA序列,以DNA合成法分别获得长度为554 bp的人源内和长度为565 bp的鼠源内皮抑素基因;分别构建携带谷胱甘肽巯基转移酶(GST)表达标签的原核表达质粒pGEX-4T1-HE和携带硫氧还蛋白A(TrxA)表达标签的原核表达质粒pET-32a-ME,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,获得不同表达标签的HE、ME重组蛋白. 最后通过鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)试验验证重组蛋白的抗血管生成活性. 结果表明,构建了人与鼠源内皮抑制素基因不同标签表达载体,在大肠杆菌中成功诱导表达. 获得具有活性的人与鼠源ES重组蛋白. 纯化复性后的重组蛋白能明显抑制新生血管的生长. GST和TrxA标签对增进重组ES可溶表达没有显著差异,两组标签的重组蛋白都主要存在于包涵体内.
中图分类号: