摘要: 肉苁蓉细胞在培养过程中易发生褐变. 通过对褐变前后细胞的多酚含量、褐变强度与多酚氧化酶活性的比较,确定了肉苁蓉多酚氧化酶酶促褐变是肉苁蓉褐变的主要原因. 通过测定不同pH下的酶活性,确定肉苁蓉多酚氧化酶的最适pH为5.8~6.0. 在最适pH条件下,比较了维生素C(Vc)、柠檬酸、Na2SO3等对肉苁蓉多酚氧化酶活性的影响,发现这几种物质对多酚氧化酶活性均有抑制效果,其中Vc随浓度的增大对多酚氧化酶的抑制作用显著,当其浓度达到0.6 mg/L时,多酚氧化酶的酶活降低为最适酶活的5.1%. 进一步在肉苁蓉细胞继代培养中添加Vc配合使用活性炭,优化出Vc-活性炭培养基. 添加1.0 g/L活性炭和3.0 mg/L Vc(附加1.0 mg/L IAA和4.0 mg/L KT)的B5培养基能有效抑制细胞褐变,使细胞褐变程度仅为原来的21%,细胞生长旺盛,最大细胞相对增长量(干重)提高了25.4%.